Цитологическое исследование отпечатков с пораженных участков слизистой оболочки рта. Для получения отпечатков сухое, обезжиренное, стерильное предметное стекло прикладывают несколько раз к исследуемому участку. Если пораженный участок трудно доступен, можно воспользоваться канцелярской резинкой. Резинку нарезают длинными узкими столбиками (рабочая часть площадью 3×3 мм), стерилизуют, высушивают, прикладывают к исследуемому участку, а затем к предметному стеклу. На каждом предметном стекле делают по 5-10 отпечатков. Препараты фиксируют в метиловом спирте 15-20 мин, микроскопируют с применением объектива х 40, а также иммерсионного объектива х 100.
Известно, что в отпечатках с пораженных участков слизистой оболочки рта в различном соотношении встречаются эпителиальные клетки ранних и поздних стадий дифференцировки. Различают следующие стадии дифференцировки эпителиальных клеток с соответствующей морфологической характеристикой [Быкова И. А. и др., 1987; Lange D., 1972].
-
стадия — базальные клетки, форма от круглой до овальной, диаметр от 16,5 до 22,5 мкм, диаметр ядра от 10 до 13,5 мкм, ядерно-цитоплазматическое соотношение (отношение диаметра ядра к диаметру клетки) составляет около 0,6. Хроматин ядра нежносетчатый, цитоплазма образует узкий ободок, базофильна.
-
стадия парабазальные клетки, форма круглая или овальная, диаметр от 17 до 45,5 мкм, диаметр ядра от 7 до 17,5 мкм, ядерно-цитоплазматическое отношение в пределах 0,5-0,6. Структура хроматина тонкая, цитоплазма менее базофильна.
-
стадия — промежуточные клетки I типа, форма овальная, диаметр от 31 до 51,5 мкм, диаметр ядра от 9 до 18,5 мкм, ядерно- цитоплазматическое отношение примерно 0,3, ядро еще достаточно тонко структурировано, цитоплазма слабобазофильная, имеет склонность к образованию выростов.
-
стадия — промежуточные клетки II типа, форма полигональная, диаметр от 25 до 88 мкм, диаметр ядра от 7,5 до 15 мкм, ядерно-цитоплазматическое отношение приблизительно 0,2. Ядро более грубо структурировано, цитоплазма слабобазофильная, образует выросты, появляются первые признаки кератинизации.
-
стадия — поверхностные клетки, форма полигональная, диаметр от 22,5 до 82 мкм, диаметр ядра от 6 до 13 мкм, ядерно- цитоплазматическое отношение меньше 0,2. Ядро пикнотично, цитоплазма от слабобазофильной до оксифильной, выражены явления кератинизации, цитоплазма образует широкие выросты, границы цитоплазмы нечетко контурированы.
-
стадия — безъядерные клетки, форма неправильная, диаметр от 28 до 55 мкм, цитоплазма оксифильная, с высокой степенью кератинизации, на месте ядра часто видна полость.
В отпечатках со здоровой слизистой оболочки обнаруживают лишь клетки поздних стадий дифференцировки: единичные клетки III стадии, около 10% клеток IV стадии, около 40% клеток V стадии и 50% клеток VI стадии. Соотношение клеток разных стадий дифференцировки в норме может зависеть от локализации в полости рта участка слизистой оболочки, с которого получен отпечаток.
Для объективной сравнительной оценки цитологических характеристик отпечатков слизистой оболочки полости рта проводят математическую обработку результатов цитограмм по следующей формуле:
ИДК= 1а+2б+3в+4г+5д+6е, где ИДК — индекс дифференцировки клеток; 1, 2, 3, 4, 5, 6 цифровые обозначения степеней дифференцировки клеток; а, б, в, г, д, е — буквенные обозначения количества клеток (%) соответствующей степени дифференцировки при подсчете цитограмм отпечатков на 100-200 клеток.
Соответственно индекс дифференцировки для нормальной слизистой оболочки будет ориентировочно равен: ИДК=4•10+5•40+6•50=540 (в норме может колебаться от 450 до 560).
Применение ИДК для оценки цитограмм отпечатков при поражении слизистой оболочки полости рта показало наглядность и удобство этого показателя для практического наблюдения в динамике заболеваний. При язвенно-воспалительных процессах ИДК может снижаться до 200-300 в острый период, при гиперкератозах — увеличиваться до 600, на различных этапах лечения снова приближаться к норме.
Помимо клеток эпителия, в отпечатках слизистой оболочки обнаруживаются лейкоциты, эритроциты, гистиоциты, макрофаги, что имеет важное значение для характеристики процесса. Большое значение для диагностики имеет обнаружение клеток опухоли, клеток Цанга и т. п. По препаратам отпечатков также можно ориентировочно судить о характере микрофлоры.